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常規反相色譜柱安裝及使用維護指南
發布時間:2019-05-05   點擊次數:2055次

新色譜柱開啟和安裝的推薦步驟:

1. 開啟色譜柱的包裝盒,查看色譜的測試報告;

2. 根據色譜柱身上箭頭標明的流向先將色譜柱入口端連入系統,柱出口端先不要連接;

3. 0.1 mL/min 流速條件下用純乙腈潤洗色譜柱,然后在2 min內將流速升至0.5 mL/min;

4. 當溶劑均勻的從柱出口端流出,停流速,將色譜柱出口端接到系統檢測器上;

5. 重啟流速,然后在0.1 mL/min 流速條件下用純乙腈潤洗色譜柱30 min,在10 min內將流速升至1.0 mL/min沖洗30 min。

6. 參考柱效測試報告中的方法,30 min內將流動相梯度轉換到柱效測試的流動相條件,然后使用5-10倍柱體積的流動相平衡色譜柱,直至壓力與基線穩定。

7. 測試柱效。如果柱效與出廠報告偏移過大,或峰形拖尾就需要進行故障排查或聯系上海易創分析儀器有限公司。

 

反相色譜柱的清洗與再生:

1. 發現柱壓升高,色譜峰出現嚴重拖尾、肩峰甚至峰分岔,或分離度降低,有可能是樣品溶解度、色譜柱溫度、堿性化合物干擾,也很有可能是色譜柱受污染,可以采取以下措施:

2. 如系統有連接在線過濾器或保護柱,首先排查在線過濾器與保護柱,可能需要更新。

3. 使用純有機相低流速沖洗過夜。(如有使用緩沖鹽,應使用不含緩沖液的流動相沖洗1h,然后再梯度過渡到純有機相低流速沖洗過夜。)

4. 如有機相清洗不能解決問題,可采用如下方法進行色譜柱的清洗和再生。根據樣品的性質以及你了解的污染物性質選擇清洗方法,用20-30倍柱體積(4.6*250 mm分析色譜柱大約80-120 mL溶劑清洗,流動相溫度升至30-50 oC,然后再重復步驟3的方法。

5. 氨基柱

 

反相色譜柱的保存:

1. 反相色譜柱應保存于純有機相中(如乙腈或甲醇)。色譜柱使用于高溫或pH條件下,或停用超過48小時,應當進行簡單的清洗過程;

2. 清洗首先用不含緩沖鹽的流動相沖洗20-30倍柱體積, 然后30 min內梯度過渡到純有機相,再用純有機相沖洗20-30倍柱體積;

3. 后使用原配的柱堵頭擰緊,確保堵頭溶劑不會揮發。若是氨基柱則應該在步驟2中添加0.1%的氨水,有利于延長氨基柱的壽命;

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