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辣椒油中羅丹明B的分析方法
發布時間:2021-05-07   點擊次數:1097次

應用簡介

本實驗采用固相萃取結合高效液相色譜的方法,建立了辣椒油中羅丹明B的檢測方法。樣品經20%丙酮的正己烷溶液(V/V)提取,Cleanert Alumina-N固相萃取柱凈化,Venusil MP C18色譜柱(4.6 × 150 mm,5 µm,100 Å)分離,水和甲醇為流動相進行洗脫,外標法進行定量。結果表明,羅丹明B添加量為0.05 mg/kg時,回收率在90% ~ 100%之間,能夠滿足檢測要求。

 

羅丹明B(Rhodamine B)又稱玫瑰紅B,或堿性玫瑰精,俗稱花粉紅,是一種具有鮮桃紅色的人工合成的染料。經老鼠試驗發現,羅丹明B會引致皮下組織生肉瘤,被懷疑是致癌物質。羅丹明B在溶液中有強烈的熒光,用作實驗室中細胞熒光染色劑、有色玻璃、特色*和爆竹等行業。曾經用作食品添加劑,但后來實驗證明羅丹明B會致癌,現在已不允許用作食品染色。

 

因此通過有效的實驗技術手段,對辣椒油中的有關羅丹明B殘留進行監控,以確保消費者對辣椒油消費的安全具有重要意義。

 

本實驗通過優化前處理方法建立了羅丹明B在辣椒油中的高效液相色譜的檢測方法。

實驗部分

儀器、試劑與材料

主要儀器設備

高效液相色譜儀(紫外檢測器);

博納艾杰爾12位負壓SPE裝置。

 

試劑材料

丙酮、甲醇、正己烷為色譜純;實驗用水為超純水;羅丹明B標準品(純度99%);

一次性無菌注射器;Nylon針式過濾器(0.45 µm,直徑13 mm);

Cleanert Alumina-N固相萃取柱:2000 mg/6 mL

 

樣品制備

樣品提取

稱取1 g辣椒油于40 mL玻璃瓶中,加入10 mL 20%丙酮的正己烷溶液(V/V),振蕩搖勻后待凈化。

 

樣品凈化

先將小柱用6 mL正己烷活化平衡,然后將待凈化液過柱,棄去全部流出液,然后用10 mL 20%丙酮的正己烷溶液(V/V)進行淋洗,最后用10 mL 2%氨化甲醇(V/V)洗脫。收集洗脫液于40℃氮氣吹干,用1 mL甲醇溶解殘留物,過0.45 µm Nylon針式過濾器后待測。

以上凈化步驟可用卓睿全自動固相萃取儀完成。

 

實驗條件

液相條件

色譜柱:Venusil MP C18,5 µm,100 Å,4.6 × 150 mm

流動相:甲醇︰水=75︰25(V/V

  溫:30

進樣量:20 µL

檢測波長:550 nm

 

結果與討論

實驗結果

由表1可知,采用固相萃取結合液相色譜法檢測羅丹明B,辣椒油基質加標回收率在90%以上,能夠滿足標準要求。

 

表1.辣椒油中羅丹明B加標回收實驗結果

物質名稱

保留時間

添加水平/mg/kg

平均回收率 /%

RSD /%

羅丹明B

5.578

0.05

95.7

1.3

 

圖1. 0.05 µg/mL羅丹明B標準溶液液相色譜圖

 

圖2. 辣椒油基質空白液相色譜圖

 

圖3. 0.05 mg/kg辣椒油基質加標液相色譜圖

 

結論

本實驗建立了辣椒油中羅丹明B殘留量的檢測方法,并結合高效液相色譜對辣椒油中羅丹明B的含量進行了測定。對于加標量為0.05 mg/kg的辣椒油樣品,回收率在90% ~ 100%之間,符合實驗要求。

 

附:相關產品

產品名稱

規格描述

包裝數量

訂貨號

Venusil MP C18

5µm,100Å,4.6×150mm

1

VA951505-0

Cleanert Alumina-N

2000mg/6mL

30支/

AL20006N

Qdaura® 卓睿全自動固相萃取系統

4通道

1

SPE-40

15位氮吹儀

15

1

NV15-M

保護柱套

適用于4.6×10mm和2.1×10mm

1

SH-100

直聯式保護柱芯

5µm,100Å;4.6×10mm

4支/

VA950105-0S

1.5 mL樣品瓶

短螺紋透明帶書寫處 32×11.6mm

100/pk

1109-0519

1.5 mL樣品瓶蓋

9mm中心孔藍蓋,紅色橡膠/米色PTFE隔墊 45°Shore A; 1.0mm

100/pk

0915-1819

Nylon針式過濾器

單膜,13mm,0.45µm

200個/

AS021345

一次性注射器

2 mL無針頭

100支/

LZSQ-2ML

 

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